Laboratoř experimentální hepatologie ****************************************************************************************** * ****************************************************************************************** Na pracovišti experimentální hepatologie se zaměřujeme na problematiku toxického poškození hepatoprotekce, jaterní regenerace a v poslední době zejména na jaterní steatózu asociovan dysfunkcí (MASLD). Játra jsou hlavním metabolickým orgánem, který koordinuje homeostázu celého těla a jsou ta místem biotransformace xenobiotik a řady endogenních látek. Jaterní mitochondrie hrají v t velmi důležitou roli a porucha jejich funkcí provází většinu jaterních patologií. MASLD je jaterní projev metabolického syndromu a v současnosti představuje nejčastější chronické on Někteří autoři dokonce považují MAFLD za mitochondriální onemocnění. Studium mitochondriál možností jejich ovlivnění je tedy velmi důležité z hlediska pochopení patologických mechan diagnostiky a léčby jaterních nemocí. Ke studium jaterních funkcí využíváme na našem pracovišti různé modelové systémy (jaterní izolované mitochondrie, izolované hepatocyty, stabilizované a nádorové buněčné linie), z n výhody i omezení. V poslední době se objevují důkazy, že energetický metabolismus krevních celkový metabolický stav organismu, a tedy i stav jater. Jelikož krevní destičky představu jaterní tkáně snadno dostupný biologický materiál, může být posouzení jejich energetického i pro diagnostiku poškození jater a pro sledování efektu případné terapie. Pro posouzení m funkcí je nezbytné mít k dispozici přístrojové vybavení a s ostatními laboratořemi harmoni pracovní postupy. Naše laboratoř byla doposud vybavena třemi oxygrafy Oroboros-2k. Díky vhodné kombinaci růz rozpřahovačů a specifických inhibitorů umožňuje oxygraf hodnotit různé energetické dráhy, respirační komplexy i funkce (index respirační kontroly, intenzitu tvorby ATP, integritu v mitochondriální membrány). Kombinací s fluorescenčními senzory můžeme také hodnotit např. membránový potenciál, produkci reaktivních forem kyslíku a kalciovou retenční kapacitu. Ne že tento přístroj umožňuje simultánní analýzu pouze 2 vzorků v jednom oxygrafu a není možn buňky adherované k povrchu. Díky projektu Core Facilities [ URL "LFHK-192.html "] jsme již rozšířili naše unikátní přístrojové vybavení o přístroj pro měření buněčné metabolické ana Seahorse Bioscience XFe96, viz níže. Jeho výhodou je možnost simultánně analyzovat adherov 96-jamkových speciálních destičkách a kromě mitochondriální respirace hodnotit i intenzitu Nevýhodou je zejména omezený přídavek substrátů, což limituje podrobnější analýzu. Proto j metody kombinovat. Nově jsme do našeho přístrojového parku získaly díky projektu Ph.D. Inf "LFHK-188.html "] přístroj NextGen-O2k, který je kompatibilní s ostatními oxygrafy. Podrob moct analyzovat simultánně 8 vzorků, což je důležité z důvodu časové náročnosti jedné anal rozšířen o Q-modul, který umožňuje současně hodnotit redoxní stav koenzymu Q metodou cykli Koenzym Q hraje klíčovou roli v dýchacím řetězci a změny v jeho redoxním stavu jsou spojov patologiemi. Všechny naše přístroje slouží také ostatním pracovištím k analýze energetických parametrů buněk a tkání. ****************************************************************************************** * Agilent Seahorse Bioscience XFe96 Analyzer Power Pak ****************************************************************************************** Dodavatel HPST, s.r.o. Rok pořízení 2018 Cena 7,6 mil. Kč vč. DPH Financování OP VVV CORE FACILITIES [ URL "LFHK-192.html "] CZ.02.1.01/0.0/0.0/16_017/0002515 Zodpovědná osoba doc. MUDr. Otto Kučera, Ph.D. [ URL "https:// is.cuni.cz/webapps/whois2/osoba/1967794929583787/? lang=cs"] ****************************************************************************************** * Oroboros NextGen-O2k Startup, Series XB vč. O2k-Q-Module ****************************************************************************************** Dodavatel Oroboros Instruments GmbH Rok pořízení 2025 Cena 2,9 mil. Kč vč. DPH Financování OP JAK Ph.D. Infra pro UK [ URL "LFHK-188.html "] CZ.02.01.01/00/22_012/0005514 Zodpovědná osoba Mgr. Pavla Staňková, Ph.D. [ URL "https://is.cuni.cz/ webapps/whois2/osoba/1442971236463993/?lang=cs"]